کلونینگ و توالی‌یابی بخشی از ژن فسفولیپاز B2 در آسپرژیلوس فومیگاتوس

Authors

دنینگ, دیوید

رابسون, جفری

کاظمی, عبدالحسن

Abstract:

سابقه و هدف: کپک Mold پاتوژن آسپرژیلوس فومیگاتوس (Aspergillus fumigatus) به‌عنوان یک میکروارگانیسم عامل انواع عفونت‌های ریوی به‌ویژه در افراد دارای ضعف سیستم ایمنی و هم‌چنین آلرژن، آلوده کننده مواد غذایی، مولد میکوتوکسین (Mycotoxin) و در نتیجه عامل میکوتوکسیکوز (Mycotoxicosis) مورد توجه می‌باشد. قدرت تولید انواع فسفولیپازها و به‌ویژه فسفولیپاز (PLB، Phospholipase B) از عوامل کلیدی در ویرولانس این قارچ بوده و کلونینگ و تعیین توالی ژن فسفولیپاز B2 PLB2)، B2 Phospholipose) جهت بررسی ویژگی‌های ژن سنتزکننده PLB2 در این میکروارگانیسم و مقایسه خصوصیات ژن و فرآورده آن با ژن مشابه سایر میکروارگانیسم‌ها انجام گردید. مواد و روش‌ها: DNA ژنومی آ. فومیگاتوس جدا شده از خلط یک بیمار مبتلا به آسپرژیلوزیس ریوی (Pulmonary aspergillosis)، استخراج و تلخیص شد و با استفاده از دژنراتیو PCR (Degenerate PCR)، یک قطعه اولیه از ژن plb2 به طول bp542 به‌دست آمد. سپس با استفاده از PCR برگشتی (IPCR،Inverse PCR )، قطعه طویل‌تری به طول bp1175 به‌دست آمد. توالی نوکلئوتیدی قطعه ژن ثانوی، متعاقب استخراج از ژل، خالص‌سازی، پیوند به وکتور مناسب، ترانسفورماسیون و نهایتاً استخراج از سلول میزبان و تلخیص، تعیین و با تلفیق این توالی با توالی قطعه اولیه، سکوانسی به طول bp1529 حاصل گردید. یافته‌ها: آنالیز فرآورده PCR دژنراتیو اولیه و PCR برگشتی (IPCR) با بلاست X (BLASTX)، در سطح اسیدنوکلئیک، حداکثر 62% هم‌سانی با توالی نوکلئوتیدی ژن لیزوفسفولیپاز١ (LPL1) آسپرژیلوس اوریزه‌آ (A. oryza) و حداقل 39% هم‌سانی با توالی نوکلئوتیدی ژن فسفولیپازB (PLB) کریپتوکوکوس نئوفرمنس Cryptococcus neoformans را نشان داد. نتیجه‌گیری: وجود ژن فسفولیپاز B2 ((PLB2 در ژنوم آ. فومیگاتوس و مشابهت بسیار زیاد قطعه توالی‌یابی شده با ژن فسفولیپاز سایر میکروارگانیسم‌های دارای قرابت فیلوژنیک و یا فاقد قرابت فیلوژنیک با این قارچ نشان‌دهنده انتقال محافظه‌کارانه آن در مسیر تکاملی از ژنوم دودمانی و هم‌چنین نقش اساسی آن برای بیماری‌زایی میکروارگانیسم می‌باشد. توالی نوکلئوتیدی حاصله می‌تواند برای کلون نمودن و تعیین توالی ژن کامل plb2 و تعیین خصوصیات پروتئین (آنزیم) حاصل از ژن و در نهایت طراحی و سنتز واکسن و یا داروی مؤثر بر علیه میکروارگانیسم، مورد استفاده قرار گیرد.

Upgrade to premium to download articles

Already have an account?login

similar resources

کلونینگ و توالی یابی بخشی از ژن فسفولیپاز b۲ در آسپرژیلوس فومیگاتوس

سابقه و هدف: کپک mold پاتوژن آسپرژیلوس فومیگاتوس (aspergillus fumigatus) به عنوان یک میکروارگانیسم عامل انواع عفونت های ریوی به ویژه در افراد دارای ضعف سیستم ایمنی و هم چنین آلرژن، آلوده کننده مواد غذایی، مولد میکوتوکسین (mycotoxin) و در نتیجه عامل میکوتوکسیکوز (mycotoxicosis) مورد توجه می باشد. قدرت تولید انواع فسفولیپازها و به ویژه فسفولیپاز (plb، phospholipase b) از عوامل کلیدی در ویرولانس ا...

full text

تهیه آنتی ژن متابولیک آسپرژیلوس فومیگاتوس برای تشخیص سرولوژیک آسپرژیلوس

          Aspergillosis is an important systemic fungal infection with various clinical    forms and its clinical and mycological diagnosis is difficult and    compelicated but its serodiagnosis is simple and useful for some clinical    forms (aspergillomma and allergic aspergillosis). This study was performed for ...

full text

شناسایی مولکولی فسفولیپاز B3 به عنوان عامل موثر در بیماری زایی آسپرژیلوس فومیگاتوس

مقدمه فسفولیپدها یکی از ترکیبات اصلی غشا سیتوپلاسمی سلول های یوکاریوتی می باشند. فسفولیپازها نیز آنزیم هایی هستند که در همه سلول های یوکاریوت وجود دارند و با توجه به وجود فسفولیپدها در غشا سیتوپلاسمی یوکاریوت ها روشن است که قدرت تخریب غشا سیتوپلاسمی به وسیله این آنزیم ها می تواند نقش مهمی در بیماری زایی میکروارگانیسم ها داشته باشد. با توجه به موضوعات فوق، در این تحقیق کلونینگ و تعیین توالی ژن ف...

full text

شناسایی مولکولی فسفولیپاز b۳ به عنوان عامل موثر در بیماری زایی آسپرژیلوس فومیگاتوس

full text

ارزیابی تاثیر دما و ترکیبات محیط کشت بر تولید آنتی ژن کاتالاز در قارچ آسپرژیلوس فومیگاتوس

هدف : بررسی چند عامل بر میزان تولید آنتی ژن کاتالاز از قارچ اسپرژیلوس فومیگاتوس. طرح : مداخله‌ای. روش : از چهار محیط کشت که به لحاظ نوع و مقدار قند و سایر ترکیبات تشکیل دهنده محیط با یکدیگر متفاوت بودند در دو دمای 28 درجه سانتیگراد و 37 درجه سانتیگراد استفاده گردید. همچنین از دو ایزوله بیماریزای انسانی و حیوانی جهت کشت انبوه قارچ استفاده شد. میسلیوم‌های قارچی پس از 96 ساعت از سطح محیط کشت فیل...

full text

یک مورد کراتیت ناشی از آسپرژیلوس فومیگاتوس به دنبال لیزیک

هدف: گزارش یک مورد کراتیت قارچی یک‌طرفه ناشی از آسپرژیلوس فومیگاتوس به دنبال لیزیک. معرفی بیمار: زن 22 ساله‌ای، 48 ساعت بعد از لیزیک برای اصلاح نزدیک‌بینی، دچار ارتشاح قرنیه چشم چپ در سطح فاصل استروما و فلپ شد. به‌رغم درمان با قطره‌های آنتی‌بیوتیکی تغلیظ‌شده و شستشوی زیر فلپ با محلول آنتی‌بیوتیک، ارتشاح استروما پیش‌رفت کرد. دید چشم چپ، 6 روز بعد از عمل در حد شمارش انگشتان از فاصله 30 سانتی‌...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}

Journal title

کومش

volume 6 issue 1

pages 81- 92

publication date 2004-11

unfollow

{@ msg @}

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com